新喋呤試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 通用名稱:新喋呤試劑盒(酶聯(lián)免疫法) 英文名稱:Neopterin ELISA 產(chǎn)品規(guī)格:96T 產(chǎn)品貨號:RE59321 產(chǎn)品品牌:德國IBL
新喋呤試劑盒預(yù)期用途 新喋呤試劑盒可用于體外診斷定量檢測人血清、血漿和尿液中的新喋呤含量。僅用于科研使用。
前言簡介
新喋呤生物合成與細(xì)胞免疫系統(tǒng)的活性關(guān)系密切,據(jù)報道在病毒感染病人新喋呤升高,認(rèn)為升高源于直接防御病毒感染細(xì)胞的免疫應(yīng)答。已證實抗原刺激人外周血單核細(xì)胞可引起新喋呤釋放入細(xì)胞培養(yǎng)液中,人巨噬細(xì)胞在體外培養(yǎng)時受γ-干擾素刺激產(chǎn)生新喋呤。人體液中新喋呤水平的測定為細(xì)胞介導(dǎo)免疫的相關(guān)疾病監(jiān)測提供了一種有用和創(chuàng)新的工具。許多傳染病,新喋呤水平升高先于臨床表現(xiàn)和血清變化。通常樣本不會進(jìn)行所有可能的傳染病測定,因此為了降低輸血傳染的危險性,對獻(xiàn)血員樣本進(jìn)行新喋呤測定是有意義的。 測定新喋呤的其它診斷應(yīng)用有: ●重復(fù)損傷的ICU病人 ●用于預(yù)測HIV感染和惡性疾病 ●移植手術(shù)后病人并發(fā)癥的早期預(yù)測 ●自身免疫性疾病、疾病活動的指征 ●病毒感染的診斷 ●急性病毒和細(xì)菌感染的鑒別診斷 ●慢性感染復(fù)發(fā)和免疫刺激治療的監(jiān)測
新喋呤試劑盒檢測原理 本實驗應(yīng)用固相的競爭ELISA原理。樣本中的抗原和酶標(biāo)記的抗原競爭抗體的結(jié)合位點(兔抗新喋呤)??乖?抗體復(fù)合物連結(jié)到包被了羊抗兔抗體的酶標(biāo)板上。未連結(jié)的抗原經(jīng)洗滌步驟除去。底物反應(yīng)后形成的顏色強度與樣本中抗原的量成反比例關(guān)系。樣本的濃度可以直接在標(biāo)準(zhǔn)曲線中讀出。 新喋呤試劑盒組成成分
名稱 | 數(shù)量 | 成分 | 微孔板 | 12×8 | 微孔中包被了羊抗兔IgG(多克?。?/span> | 抗血清 | 1×8ml | 即用型、含抗血清(兔)、磷酸鹽緩沖液、穩(wěn)定劑 | 酶聯(lián)物 | 1×13ml | 即用型 | 標(biāo)準(zhǔn)品A~F | 6×1.5ml | 濃度:0、1.35、4.0、12.0、37.0、111nmol/L 即用型、含新喋呤、磷酸鹽緩沖液、穩(wěn)定劑 | 質(zhì)控1+2 | 2×1.5ml | 即用型、濃度/可接受范圍見質(zhì)控單 | 分析緩沖液 | 1×21ml | 即用型、含磷酸鹽緩沖液、BSA、穩(wěn)定劑 | 洗滌液 | 1×50ml | 20倍濃縮、含吐溫、穩(wěn)定劑 | 底物液 | 1×19ml | 即用型,緩沖液、穩(wěn)定劑 | 終止液 | 1×19ml | 即用型、含1M硫酸 |
所需材料(未提供) 1、移液器,體積10、50、100、1000ul 2、混合器 3、定軌振蕩器(500rpm) 4、8通道移液器,帶加樣槽 5、洗滌瓶,自動或者半自動洗板機 6、450nm酶標(biāo)儀(參考波長為600-650nm) 7、雙蒸水或去離子水 8、吸水紙,吸頭和計時器
儲存條件 新喋呤試劑盒運輸和儲存的溫度為2~8℃。避免直接的光照和加熱。微孔板拆封后保存在密封袋中2~8℃,可以穩(wěn)定至有效期。

樣本稀釋 血清、血漿 不需要稀釋,避免陽光直接照射
尿液 使用分析緩沖液按1:101稀釋 如10ul+1000ul,避免陽光直接照射 樣本的濃度高于蕞高標(biāo)準(zhǔn)品的,必須進(jìn)一步稀釋。
新喋呤試劑盒檢測步驟 1、移取20ul的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品、血清、血漿和稀釋的尿液樣本至相應(yīng)的孔中。 2、每孔加入100ul的酶聯(lián)物。 3、每孔加入新喋呤抗血清50ul。 4、蓋板,避光在振蕩器(500rpm)、室溫(18~25℃)下溫育90分鐘。 5、移去封板紙,倒出孔中溶液,洗板4次,每次每孔使用300ul稀釋的洗滌液。在吸水紙上拍干。 6、對于底物液和終止液的使用,建議使用8通道的移液器,確保每孔加入的時間間隔是相同的。避免氣泡的產(chǎn)生。 7、每孔加入150ul的底物液。 8、室溫(18~25℃)下溫育10分鐘。 9、每孔加入150ul的TMB終止液終止反應(yīng)。輕輕震動包被板使溶液混勻。 10、在15分鐘內(nèi)于450nm的酶標(biāo)儀上讀數(shù)(參考波長是600~650nm)。
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