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麻疹病毒IgG, ELISA檢測(cè)試劑盒

【前言簡(jiǎn)介】

麻疹是一高傳染性的病毒病，它早期的臨床前兆有：發(fā)燒、鼻炎、結(jié)膜炎、咳嗽和病理性的皮疹（口腔黏膜疹：Koplik斑）。由麻疹病毒引起的皮疹在其早期癥狀出現(xiàn)3到5天后出現(xiàn)，有些在接觸麻疹病毒14天后出現(xiàn)，而且還有可能伴隨有皮膚水腫。這種疾病是由副黏液病毒科麻疹病毒屬的麻疹病毒所引起的。它還可引起中耳炎、肺炎和腦炎的并發(fā)癥。在小孩和營(yíng)養(yǎng)不良的兒童中，麻疹病毒可引起更嚴(yán)重的表現(xiàn)：出血性麻疹的發(fā)病率更高，有5%到10%的死亡率。接種了無(wú)活性麻疹疫苗的人（1968年以前），其感染會(huì)有嚴(yán)重的表現(xiàn)：肺炎、全身水腫，胸腔積液和非典型皮疹。麻疹是具有高傳染性的疾病之一。麻疹病毒通過(guò)來(lái)自被感染病人呼吸道的飛沫傳播，也可直接通過(guò)接觸傳播。自從接種麻疹疫苗后，麻疹的發(fā)病率就開始降低了，麻疹病毒IgG檢測(cè)試劑盒-IBL除了用于診斷輔助，可以用來(lái)監(jiān)測(cè)疫苗效價(jià)。

【檢測(cè)原理】

麻疹病毒IgG檢測(cè)試劑盒-IBL，是一款酶免法的試劑盒，規(guī)格為96孔。此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔板上包被了抗原。用對(duì)人IgG具有特異性的酶標(biāo)二抗來(lái)檢測(cè)結(jié)合到包被抗原的樣品特異性抗體。底物反應(yīng)后，所顯示的顏色強(qiáng)度與檢測(cè)到的IgG特異性抗體的量成正比。樣品的結(jié)果可直接使用標(biāo)準(zhǔn)曲線得。

【檢測(cè)步驟】

1) 加100µL標(biāo)準(zhǔn)品，質(zhì)控品和已稀釋樣本于相應(yīng)反應(yīng)孔中，在定性檢測(cè)中只使用標(biāo)準(zhǔn)品B。雙孔檢測(cè)可提高分析可靠性。

2) 封板后37℃溫育60分鐘。

3) 移去封板紙，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。

4) 在每一微孔中加入100µL酶聯(lián)物。

5) 封板后室溫37℃溫育60分鐘。

6) 移去封板紙，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。加底物液和終止液時(shí)，如果有條件的話，可使用8孔微量移液器。確保底物液和終止液都是相同的時(shí)間間隔加入。使用確切容積并避免氣泡產(chǎn)生。

7) 每孔加TMB底物液100µL。

8) 室溫（18℃-25℃）避光溫育30分鐘。

9) 在每一微孔中加入100µLTMB終止液以終止底物反應(yīng)。輕輕搖動(dòng)微孔板以使試劑混合均勻。此時(shí)，顏色藍(lán)色變成黃色。

10) 加終止液后60分鐘內(nèi)在450nm處測(cè)OD值。

【結(jié)果計(jì)算】

定性評(píng)估

臨界值是直接從標(biāo)準(zhǔn)品B中得出。臨界指標(biāo)（COI）是由樣本的平均OD值和臨界質(zhì)控的平均OD值計(jì)算得出來(lái)的。如果樣本的平均OD值在臨界值上下10%內(nèi)，則該樣本應(yīng)判定為可疑樣本；樣本平均OD高則應(yīng)判定為陽(yáng)性；樣本平均OD值低則應(yīng)判定為陰性。

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