多巴胺試劑盒可用于人血漿和尿液中多巴胺的體外定量檢測，可手動操作，也可自動操作。進一步的研究表明：此試劑盒還可用于組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清液的研究。 多巴胺試劑盒檢測步驟
1、在一次性試管內(nèi)，用釋放緩沖液以1:51的比例稀釋提取的標準品，質(zhì)控品和尿液樣本（如：10ul提取樣本+500ul的釋放緩沖液）
2、在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液，輕輕振蕩。
3、將預稀釋的標準品，質(zhì)控品和尿液樣本加100ul至相應孔內(nèi)血漿樣本直接加100ul于相應孔內(nèi)在此步驟中，將槍頭直接觸碰COMT酶溶液，顏色會轉(zhuǎn)為粉紅色，輕輕混勻。
4、每孔中加入50μL多巴胺抗血清。
5、蓋板。在振蕩器（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育120min
6、棄去孔內(nèi)反應液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。
7、每孔加入100μL酶聯(lián)物
8、蓋板。在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育60min
9、棄去孔內(nèi)反應液，用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。
10、加底物液和終止液時，其時間間隔應相同
11、每孔加入200μL底物液
12、在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育40min。如果自動操作時的溫度超過25℃時，則應相應的將溫育時間縮短至30min。
13、每孔加入50μL PNPP終止液以終止底物反應，輕輕振蕩包被板以充分混合試劑成分。
14、加終止液后60min之內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長：620-650nm）
多巴胺試劑盒實驗標本采集必修課：
1）標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗，若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
2）血清：使用不含熱原的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
3）血漿：3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
4）細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
5）組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
6）保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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