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          首頁 > 技術(shù)文章 > 淀粉酶ELISA試劑盒
          淀粉酶ELISA試劑盒
          淀粉酶ELISA試劑盒
          美國DRG*,貨號EIA4460
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          預(yù)期用途
          此酶免試劑盒可檢測人血清和尿液中的胰淀粉酶
          僅供研究使用,不能用于診斷
          實(shí)驗(yàn)原理
          此酶免試劑盒依據(jù)的是夾心法原理。包被孔內(nèi)包被有抗人胰淀粉酶抗體,樣品與酶聯(lián)物在包被孔內(nèi)孵育,未結(jié)合的酶聯(lián)物被洗去,樣品中的人胰淀粉酶濃度與結(jié)合的酶聯(lián)物量成正比,加入底物液后,樣品中的人胰淀粉酶濃度與顏色的強(qiáng)度成正比
          注意事項(xiàng)
          1.       此試劑盒僅用于研究,不能用于診斷
          2.       不同批次的試劑盒成分不能混合使用
          貯存和穩(wěn)定性
          1.       試劑盒裝在含有干燥劑的密封袋內(nèi),貯存于2-8℃冰箱內(nèi)
          2.       未打開的試劑盒可保存至有效期
          3.       TMB底物液帶有微弱的顏色,如變藍(lán),則應(yīng)丟棄。貯存或使用期間不要將試劑暴露于強(qiáng)光下。
          試劑盒組成
          1.       微孔板,96T,包被有抗人胰淀粉酶抗體
          2.       樣品稀釋液,11ml,1瓶
          3.       酶聯(lián)物,11ml,HRP標(biāo)記的抗人胰淀粉酶抗體
          4.       參考標(biāo)準(zhǔn)品0.3ml/支,濃度為:10,50,150,300,600U/L
          5.       質(zhì)控品,0.3ml,參考值見瓶身
          6.       TMB底物液,11ml,含過氧化氫和TMB的緩沖液
          7.       洗滌緩沖液,100X,10ml,工作洗滌液的配制:10ml洗滌液+990ml去離子水
          8.       終止液,2N HCL
          9.       板架
          實(shí)驗(yàn)所需材料但試劑盒未提供
          1.       酶標(biāo)儀
          2.       移液器,體積“10,50,100ul
          3.       1L洗滌緩沖液
          樣品采集與處理
          靜脈穿刺采集全血,允許凝集,室溫下通過離心分離出血清,貯存于無菌試管內(nèi)
          如果血清不立即使用,則可保存于2-8℃下1個(gè)月,或是在-20℃凍存6個(gè)月。避免反復(fù)凍融
          實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
          1.       實(shí)驗(yàn)前,將所有試劑平衡至室溫,輕輕振蕩
          2.       準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)所需的所有試劑,一旦實(shí)驗(yàn)開始,就不能中斷
          3.       每個(gè)樣品都使用新槍頭吸取
          實(shí)驗(yàn)步驟
          1.       將實(shí)驗(yàn)所需的板條固定好
          2.       加10ul的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品于相應(yīng)的孔內(nèi)
          3.       每孔加入100ul的酶聯(lián)物
          4.       室溫下孵育60min
          5.       洗滌液洗板5次(300ul/孔)
          6.       每孔加入100ul的TMB底物液,包括blank 孔
          7.       室溫下孵育30min
          8.       每孔加50ul終止液終止反應(yīng),然后在酶標(biāo)儀450nm處讀數(shù)
          結(jié)果計(jì)算
          1.       以參考標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸,吸收值為Y軸,在坐標(biāo)紙上繪制曲線
          2.       從標(biāo)準(zhǔn)曲線上可得到樣品中胰淀粉酶的值
          標(biāo)準(zhǔn)曲線經(jīng)典例子
           
           
           
           
           
          附:采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測,只需檢測前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù),如坐標(biāo)參數(shù)(線性,半對數(shù))和計(jì)算方式參數(shù)(三次回歸、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程),可直接得出結(jié)果
           
          本譯文僅供參考,詳情請以原文為準(zhǔn)。
           
           
           
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